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Clásicos

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En este rubro pueden ser de tres tipos: naturales, semisintéticos y sintéticos. Los naturales están elaborados con leche, huevo, granos de cereales, levadura de cerveza, frutas y otros compuestos. Los semisintéticos, como el Sabouraud, aportan una fuente de carbono y nitrógeno. Los sintéticos tienen una composición química bien definida y se usan en investigación; no son de uso sistemático.

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Los medios de cultivo clásicos se preparan con facilidad; los ingredientes se disuelven por separado en agua y se mezclan en un matraz de Erlenmeyer; se calientan 15 minutos a baño María y 5 a 6 minutos en el mechero, la solución se coloca en tubos y se procesa en autoclave a 110 °C durante 15 a 20 minutos; al sacarlos se colocan en posición inclinada para aumentar la superficie de cultivo. Cuando sea necesario el ajuste de pH, se emplearán ácido clorhídrico (HCl) o hidróxido de sodio (NaOH). Se pueden utilizar cajas de Petri, que deben llenarse después de esterilizar el medio.

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Si se emplea tapón de rosca no se debe tapar herméticamente para facilitar la llegada de oxígeno, o se pueden usar tapones de algodón.

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Todas las manipulaciones han de realizarse en el área de esterilidad de la llama de un mechero de Bunsen o en una campana de flujo laminar.

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Medio glucosado de Sabouraud

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Es el medio clásico de aislamiento; en ocasiones no es el idóneo, pero se emplea de manera universal para la identificación sistemática de los hongos.

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Fórmula original:

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Glucosa cruda 4 g

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Peptona granulada (chapoteaut) 1 g

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Agar agar 2 g

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Agua destilada 100 ml

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Fórmula modificada:

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Glucosa 20 g

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Peptona 10 g

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Agar agar 20 g

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Agua destilada 1 000 ml

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Medio de Sabouraud con antibióticos

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Se añaden, disueltos en 10 ml de acetona; cloranfenicol 0.05 g, o cicloheximida (Actidione) 0.5 g, o ambos (se dispone en el comercio de medios ya preparados como Mycosel-agar, Micobiotic-agar, Dermasec-agar), que evitan el crecimiento de bacterias y hongos saprofitos.

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Para cualquier aislamiento, se recomienda el medio simple de Sabouraud y el adicionado con antibióticos, pero debe evitarse el cloranfenicol si existe sospecha de actinomicetos, o la cicloheximida (Actidione) si se sospecha de enfermedad por agentes oportunistas.

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Otros medios de cultivo

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Medio líquido de Sabouraud

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Es igual al medio simple de Sabouraud, pero sin agar; puede emplearse para rehidratar cultivos desecados.

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Fórmula:

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Peptona 30 g

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Glucosa 20 g

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Agua destilada 1 000 ml

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Medio de conservación

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No tiene azúcares; se emplea para ...

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