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INTRODUCCIÓN

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Este capítulo revisa la estructura y función básica de los componentes que constituyen a las células eucariotas y procariotas. El capítulo inicia con el análisis del microscopio. Desde el punto de vista histórico, el microscopio reveló por primera vez la presencia de bacterias y más tarde, los secretos de la estructura celular. Hoy en día es aún una herramienta poderosa en el estudio de la biología celular.

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MÉTODOS ÓPTICOS

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El microscopio de luz

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El poder de resolución del microscopio de luz bajo condiciones ideales es de casi la mitad de la longitud de onda de la luz utilizada. (El poder de resolución es la distancia que debe separar dos puntos de fuentes de luz para que puedan observarse como dos imágenes distintas.) Con la longitud de onda de la luz amarilla con 0.4 μm, los diámetros separados más pequeños son de casi 0.2 μm (p. ej., casi la tercera parte del ancho de una célula procariota típica). La utilidad del microscopio radica en que la magnificación hace visibles las partículas más pequeñas alcanzables en el poder de resolución. A continuación se revisan varios tipos de microscopios de luz, los cuales se utilizan a menudo en microbiología.

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A. Microscopio de campo brillante
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El microscopio de campo brillante es el utilizado más a menudo en los cursos de microbiología y consiste en dos series de lentes (objetivo y ocular) que actúan en conjunto para la resolución de la imagen. Estos microscopios por lo general emplean una lente objetivo con 100 aumentos y una lente ocular con 10 aumentos, con lo que la magnificación de la muestra es de hasta 1 000 veces. Las partículas con diámetros de 0.2 μm se incrementan de tamaño a casi 0.2 mm, por lo que se hacen claramente visibles. La magnificación adicional no brinda mayor resolución de detalle y puede reducir el área de visibilidad (campo).

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Con el microscopio, las muestras se tornan visibles por las diferencias en el contraste entre ellas y el entorno. Muchas bacterias son difíciles de observar bien por la falta de contraste con el medio circundante. Pueden utilizarse colorantes para teñir las células o sus organelos e incrementar el contraste, de forma que sean visibles con mayor facilidad en la microscopia de campo brillante.

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B. Microscopio de contraste de fases
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El microscopio de contraste de fases se desarrolló para mejorar las diferencias de contraste entre las células y el medio circundante, con lo que se hace posible observar células vivas sin tinción; con los microscopios de campo brillante deben utilizarse preparaciones de microorganismos muertos y teñidos. La microscopia de contraste de fases toma ventaja del hecho de que la luz pasa a través de objetos transparentes, como las células, y se fusiona en diferentes fases dependiendo de las propiedades de los materiales ...

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