Capítulo 41: Técnicas inmunológicas para el estudio de antígenos parasitarios

La cantidad de parásitos protozoarios y helmintos que afectan la vida de los humanos y la de los animales es considerable. El estudio de sus antígenos es complejo, ya que existen formas antigénicas variadas, dependiendo de las diferentes etapas de su ciclo de vida.

Las técnicas para el estudio de antígenos parasitarios evolucionaron a medida que aparecieron nuevos métodos para aislar, purificar y determinar su estructura química (por ejemplo, la secuencia de aminoácidos de antígenos proteicos). Con la mejora de las técnicas inmunológicas se ha logrado la automatización y la robotización, pero sobre todo el incremento de la sensibilidad diagnóstica, lo cual hace posible un estudio más detallado y amplio de los antígenos parasitarios. Para los interesados en la evolución histórica de este tema se recomienda la lectura de las primeras tres referencias de este capítulo, que tratan con profundidad y detalle todas las técnicas que se emplearon hasta antes de 1983.

El fundamento de las técnicas para el estudio de los antígenos parasitarios, desde sus orígenes hasta el momento actual se basa en dos estrategias: a) identificación o cuantificación de anticuerpos contra componentes de los parásitos, b) identificación directa o indirecta de los parásitos o alguno de sus componentes.

En el presente capítulo se aborda la importancia médica del estudio de los antígenos parásitos y su clasificación, se describe el fundamento metodológico de las técnicas más comunes en el estudio de los antígenos y, por último, se dan algunos ejemplos prácticos recientes del uso de las herramientas modernas de diagnóstico que revisten interés clínico.

Los antígenos de los parásitos se pueden clasificar según la fuente de donde se obtienen para su estudio o aplicación clínica y su naturaleza química. Los parásitos tienen ciclos de vida complejos con capacidad de reproducirse dentro del hospedero (protozoarios) o aquellos que maduran pero no se reproducen dentro del hospedero (helmintos). Esta diversidad de etapas o estadios que el parásito debe completar en su ciclo vital implica un cambio estructural, bioquímico y celular que se refleja en la diversidad de antígenos que se pueden presentar de acuerdo con las diferentes etapas de desarrollo, las cuales pueden ser concurrentes en un mismo hospedero, por lo cual un parásito puede expresar diferentes antígenos de distintos estadios en un mismo hospedero. En consecuencia, la inmunidad despertada por estos antígenos por lo general es específica de estadio. Debido a todo lo anterior es importante, tanto para fines diagnósticos como de investigación de la respuesta contra los parásitos, identificar su fuente u origen. Una clasificación práctica de los antígenos parasitarios de acuerdo con su origen es la siguiente:

1. Antígenos solubles extraídos del parásito (somáticos)

2. Antígenos solubles excretados o secretados

3. Antígenos sintéticos

4. Antígenos recombinantes

Los antígenos somáticos o estructurales son extraídos del parásito; no son secretados por los parásitos, sino que forman parte estructural de ellos y es necesario utilizar procedimientos de extracción química para obtenerlos. Estos antígenos, a excepción de aquellos presentes en la cutícula o membranas de superficie, pueden estar ocultos al hospedero y ser reconocidos sólo por el sistema inmune después de la muerte del parásito.

Los antígenos solubles excretados o secretados al medio de cultivo son derivados de procesos metabólicos del parásito y fueron la fuente de antígenos de protozoarios, nematodos, cestodos, artrópodos y otros. Sin embargo, la concentración de estos antígenos en el medio de cultivo de protozoarios o donde se mantienen helmintos regularmente es muy baja, por lo que se requiere cultivar o mantener grandes cantidades de ellos para obtener volúmenes útiles de material antigénico.

Los antígenos sintéticos se obtienen por síntesis química en un laboratorio cuando ya se conoce la secuencia de aminoácidos del péptido o proteína antigénica contra la cual se dirige la mayoría de los anticuerpos producidos por el huésped. La fuente de antígenos sintéticos es prácticamente inagotable, es reproducible y de costo relativamente bajo; sin embargo, su producción está condicionada al conocimiento preciso de la secuencia de aminoácidos de los antígenos.

Los antígenos recombinantes son en general de naturaleza peptídica o proteica y se originan con técnicas de ácido desoxirribonucleico (DNA) recombinante; para ello, el gen que codifica para un antígeno de un parásito se expresa en bacterias como E. coli o levaduras metilotróficas como Pichia pastoris. A partir de cultivos masivos en fermentadores se obtienen las bacterias recombinantes que producen o secretan el antígeno parasitario cuyo gen fue introducido artificialmente, y luego se realiza la purificación, que puede incluir columnas de afinidad con anticuerpos.

Los métodos modernos en el campo de la biología molecular e ingeniería genética hicieron posible avances notables en el campo de la parasitología; por ejemplo, se aisló el DNA que codifica para una proteína parasitaria que es blanco de la respuesta inmunitaria de los individuos infectados, y se utiliza con resultados satisfactorios en el caso de Toxoplasma gondii y Entamoeba histolytica.

También es posible clasificar a los antígenos, según su composición química, en proteínas, glucoproteínas, glucolípidos y polisacáridos y ácidos nucleicos.

Es importante conocer la composición de un antígeno, porque con base en esa información se seleccionan las técnicas adecuadas para identificarlo o aislarlo. Esto es de particular importancia en la actualidad, ya que los antígenos parasitarios son investigados de manera exhaustiva en busca de moléculas que induzcan inmunidad protectora mediante vacunas, moléculas que promuevan actividad inmunomoduladora benéfica en enfermedades autoinmunes o moléculas con actividad antiinflamatoria. Algunos autores clasifican a los antígenos de los parásitos de acuerdo con la fase del ciclo de vida del parásito o con las cepas de donde son obtenidos.

Los antígenos parasitarios se clasifican también según la respuesta inmunitaria que inducen en el huésped; en ese caso se les llama antígenos humorales, cuando la respuesta identificada es sobre todo anticuerpos, y antígenos celulares cuando estimulan una respuesta inmunitaria celular mediada por linfocitos T y que, en ocasiones, se manifiesta como hipersensibilidad tardía. Por otra parte, según la protección que son capaces de inducir en animales de experimentación,los antígenos se clasifican como protectores cuando se demuestra que impiden el establecimiento o la reproducción del parásito en el hospedero después de la inmunización.

Para todos los profesionales del área biomédica, pero en particular para los médicos, es muy importante el estudio de los antígenos parasitarios porque este conocimiento sirve para:

1. Establecer el diagnóstico de infección reciente o antigua en algunas parasitosis.

2. Identificar los antígenos que inducen protección y que pueden ser útiles en la vacunación.

3. Estudiar los factores de virulencia de los parásitos y conocer los mecanismos de patogenia de las lesiones celulares o tisulares durante la interacción con el huésped.

4. Diseñar o mejorar las técnicas diagnósticas existentes para confirmar la presencia de parásitos en seres humanos y en animales.

5. Identificar moléculas con potencial terapéutico en autoinmunidad e inflamación.

La demostración de anticuerpos contra los antígenos parasitarios se puede hacer en forma cualitativa y cuantitativa. Estas dos formas no son mutuamente excluyentes, sino complementarias, ya que en una zona geográfica endémica de una parasitosis la identificación cualitativa de anticuerpos circulantes es de poca utilidad clínica diagnóstica. Tales anticuerpos pudieron ser inducidos en infecciones previas y, por tanto, representan la suma de la respuesta inmunitaria actual y la previa. En esta situación resulta mejor cuantificar los anticuerpos y determinar su isotipo, es decir, identificar la clase de inmunoglobulina a la que pertenecen dichos anticuerpos. Cabe recordar que el primer encuentro o la primera infección con un agente infeccioso o la vacunación con cualquier antígeno induce anticuerpos del isotipo IgM. Estos anticuerpos caracterizan la respuesta inmunitaria primaria. Las exposiciones posteriores al mismo antígeno inducen anticuerpos del isotipo IgG, que predominan en la respuesta inmune secundaria. Este conocimiento es fundamental para interpretar en forma correcta un resultado de laboratorio clínico inmunoparasitológico. En esta evaluación el médico debe además solicitar información sobre la técnica utilizada y si se trata de una determinación de anticuerpos totales, es decir, de todos los isotipos IgG, IgM, IgA, IgE e IgD en conjunto o sólo de alguno de ellos.

En el ejemplo hipotético ya mencionado, el uso de una técnica cualitativa en una zona geográfica donde es endémica una parasitosis resultó de poca ayuda diagnóstica para el médico. Si ahora se cambia el mismo caso de ese paciente a una zona geográfica no endémica donde esta enfermedad parasitaria no existe o es de baja prevalencia, se observa que aquí sí es muy útil la información cualitativa acerca de la presencia de anticuerpos antiparásito para establecer el diagnóstico de dicha enfermedad.

En el mundo globalizado actual son más comunes los viajes de personas, transporte de materiales y animales desde una región donde es endémica una enfermedad parasitaria hasta otros países donde dicha parasitosis no existe. Esto trae a colación la trascendencia del interrogatorio cuidadoso y detallado acerca de viajes, contactos con personas o animales provenientes de otros sitios para interpretar en forma correcta el resultado del laboratorio cuando se está frente a un paciente con sospecha de parasitosis.

El estímulo antigénico intermitente o permanente que proporciona el parásito al hospedero durante la infección y la respuesta efectora del mismo a base de anticuerpos permiten la búsqueda de estos últimos con fines diagnósticos, a fin de encontrar una correlación positiva entre el cuadro clínico y las pruebas serológicas. Las técnicas para demostrar la presencia de anticuerpos contra parásitos o sus componentes antigénicos han cambiado mucho en los últimos años; sin embargo, estas pruebas inmunológicas permanecen como procedimientos de laboratorio especializado que permiten el diagnóstico en circunstancias en que la identificación física del parásito no es posible. Como todas las pruebas inmunológicas de diagnóstico, se basan en la unión antígeno-anticuerpo y dependen de una alta sensibilidad analítica (capacidad de identificación de muy pequeñas cantidades de analitos). Al igual que cualquier prueba diagnóstica, se fundamentan en su valor predictivo, en donde los términos básicos son la sensibilidad diagnóstica y la especificidad. La sensibilidad diagnóstica es la capacidad de determinar que un individuo está enfermo al tener un resultado anormal de la prueba. La especificidad diagnóstica es la capacidad de la prueba de identificar a un individuo como “no enfermo” al tener un resultado normal. La cantidad de técnicas diferentes para mostrar anticuerpos contra parásitos crece día con día, lo cual indica que todas ellas tienen desventajas o problemas. A continuación se revisa en forma general en qué consisten estas técnicas.

Inmunofluorescencia

En esta técnica se pone en contacto el suero del paciente con los parásitos muertos y preservados o sus antígenos, y luego de lavar se añade la fluoresceína conjugada o unida a un anticuerpo antiinmunoglobulina humana. Se observa bajo el microscopio de fluorescencia si la prueba resulta positiva. El resultado aquí obtenido es cualitativo, pero también se puede diluir el suero del paciente hasta determinar la dilución a la cual todavía hay resultados positivos. De esta manera se tiene una técnica semicuantitativa; sin embargo, esta prueba como tal no es de uso común en el laboratorio, porque se requiere tener un microscopio de fluorescencia y reactivos perecederos, además de que es difícil mantener la fuente de parásitos.

Los métodos inmunológicos evolucionaron para mejorar la especificidad y la sensibilidad, lo cual, aunado a las necesidades antes descritas, hizo menos común el uso de la inmunofluorescencia. Las dificultades para obtener parásitos intactos impulsaron el uso de extractos parasitarios, y con ello la aplicación de inmunodifusión simple y doble, precipitación, aglutinación, contrainmunoelectroforesis y, más recientemente, los estudios inmunoenzimáticos como el ensayo por inmunoabsorción ligado a enzimas (ELISA, Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay), Inmuno dot y Western blot.

Inmunodifusión

La inmunodifusión simple o doble se basa en la reacción de antígenos y anticuerpos en un medio sólido, como el gel de agar o de agarosa. La reacción antígeno-anticuerpo es visible, ya que ocurre una precipitación que se manifiesta como una o varias bandas, según se trate de una o varias especies de antígenos o de anticuerpos. Estas técnicas, aunque extraordinariamente simples y rápidas, cayeron en desuso porque se requieren concentraciones altas de reactantes, es decir, de antígenos parasitarios y de anticuerpos que tienen baja sensibilidad y, en consecuencia, poca utilidad clínica.

Aglutinación

Esta técnica es más sensible que la difusión, y consiste en hacer reaccionar los antígenos parasitarios y los anticuerpos sobre partículas de látex o sobre eritrocitos. En este último caso se denomina hemaglutinación. Para este método se obtienen los extractos antigénicos de los parásitos, y luego, mediante una reacción química, esas moléculas se enlazan en forma covalente a los eritrocitos o a las partículas de látex. Puede realizarse en placas de microtitulación, lo cual permite efectuar de manera simultánea un número grande de muestras. Aunque estas técnicas tienen mayor sensibilidad que las de inmunodifusión, consumen más tiempo que otras técnicas que se describen más adelante.

Contrainmunoelectroforesis

Consiste en poner la muestra de suero con los anticuerpos al lado de un gel y el antígeno o los antígenos parasitarios enfrente. Enseguida se aplica una corriente eléctrica; según la carga eléctrica, los reactantes migran al polo positivo o al negativo. Cuando se encuentran en su concentración óptima ocurre la reacción antígeno-anticuerpo, que se manifiesta como una banda de precipitación.

Pruebas inmunoenzimáticas

A partir de la publicación de Engvall y Perlman en 1972, las pruebas inmunoenzimáticas han contribuido tanto a la investigación como al servicio médico diario, ya que se trata de técnicas más sensibles que todas las ya descritas en los párrafos anteriores. El amplio uso de estas técnicas confirma que se trata de pruebas sensibles, confiables, reproducibles y específicas. Todos los antígenos de naturaleza proteica o peptídica pueden ser fijados en el fondo de un pozo de una microplaca de poliestireno o de cloruro de polivinilo con ayuda de un amortiguador de pH alcalino; el suero de las personas o pacientes que se desea probar se agrega a la placa. Los anticuerpos circulantes específicos para el antígeno reaccionan en el fondo de la placa, y la reacción antígeno-anticuerpo se hace visible mediante la adición de un anticuerpo antiinmunoglobulina humana conjugado con una enzima. Después, mediante una mezcla del sustrato y un agente que genera color, aparece una reacción colorida cuya intensidad se determina en un espectrofotómetro. Este instrumento permite cuantificar con precisión la cantidad de anticuerpo o antígeno presente.

La Inmuno dot también es una prueba inmunoenzimática, pero la reacción antígeno-anticuerpo ocurre en un papel de nitrocelulosa y no en una placa. Esta técnica es más simple y no requiere instrumentos para su lectura; se ha adaptado para obtener resultados en sólo ocho minutos. Una versión de esta técnica recibe el nombre de prueba rápida, ya que se utiliza un conjugado de proteína A con oro coloidal para hacer visible la reacción antígeno-anticuerpo. Estas pruebas son de uso generalizado en las zonas geográficas donde no existe infraestructura médica que permita el uso de técnicas más complejas.

Prueba Western blot o de inmunoelectrotransferencia

En esta técnica se hace reaccionar el suero o plasma de un paciente con una tira de nitrocelulosa que contiene uno o más antígenos parasitarios. La reacción antígeno-anticuerpo es evidente cuando se agrega una mezcla de sustrato cromógeno; los resultados se notan a simple vista. Esta técnica es en realidad muy sencilla si se compran las tiras reactivas, de lo contrario se requiere un equipo de electroforesis para preparar geles de poliacrilamida y también un equipo para transferir las proteínas del gel al papel de nitrocelulosa.

Problemas y limitaciones de las técnicas para estudiar antígenos parasitarios

En los últimos 20 años se establecieron varias casas comerciales extranjeras que venden en México estuches completos para efectuar la titulación de anticuerpos contra antígenos parasitarios mediante las técnicas descritas en este capítulo. En la mayoría de los casos, dichas casas cambiaron también las técnicas y la fuente de antígenos. Todo esto, aunado al inconveniente del costo y los problemas de especificidad y sensibilidad, representan hoy en día un problema para diseñar y mejorar las pruebas existentes. En esta sección se tratan los dos principales problemas compartidos, en cierta forma, por todas las técnicas descritas: falta de especificidad y de sensibilidad.

Falta de especificidad

Este problema se debe en buena medida al uso de extractos antigénicos crudos, es decir, no purificados y, por tanto, no definidos en términos químicos. La presencia de antígenos o proteínas contaminantes del huésped de donde se obtuvieron los parásitos también contribuye a la falta de especificidad. Incluso el cultivo de los parásitos se puede contaminar en el laboratorio con proteínas o componentes del medio de cultivo. Debido a que no existen patrones de referencia de antígenos específicos de los parásitos que sirvan como estándar, se vivió una época de variación entre los resultados publicados por diferentes autores. Este problema se resolverá por completo cuando se disponga de la información completa acerca de los antígenos parasitarios inmunodominantes, que además sean específicos de especie, es decir, que no los compartan diferentes organismos. Una vez identificados, aislados y purificados dichos antígenos, es preciso definir el epítopo o los epítopos contra los cuales están dirigidos los anticuerpos. Esos epítopos o determinantes antigénicos son en general una pequeña porción de una proteína que puede ser sintetizada químicamente para tener siempre una fuente homogénea del mismo material.

En algunas parasitosis los investigadores han logrado definir, aislar y purificar determinados antígenos específicos de especie. Algunos de esos antígenos son de naturaleza proteica, por lo cual se pudo obtener la secuencia de aminoácidos de los epítopos pertinentes; con esa información se sintetizaron los péptidos y se resolvieron los problemas de abastecimiento y variación en la composición antigénica. En algunas parasitosis ya se dispone de productos obtenidos de esta forma, pero no existen preparaciones semejantes para todas las parasitosis de interés médico.

Falta de sensibilidad

Algunas pruebas, como la aglutinación de partículas de látex o la f loculación de bentonita, ya casi no se utilizan porque es inaceptable la cantidad tan elevada de resultados falsos positivos y negativos que se generan. Algunas compañías comerciales de Estados Unidos, Inglaterra y Alemania vendieron a los países en desarrollo varias pruebas de inmunof luorescencia para el diagnóstico de infecciones, como la enfermedad de Chagas, leishmaniosis y esquistosomosis, que cada vez se utilizan menos debido a su baja sensibilidad. Las pruebas de aglutinación de látex y eritrocitos, aunque permiten conocer el título de anticuerpos contra algunos antígenos parasitarios y fueron de cierta utilidad en el pasado, no reúnen las características de especificidad, sensibilidad, reproducibilidad y estabilidad que se requieren en el laboratorio clínico moderno, por lo cual han caído en desuso.

Las pruebas para cuantificar anticuerpos y antígenos parasitarios mejoraron en forma sustancial cuando se emplearon las técnicas inmunoenzimáticas, o ELISA, que se iniciaron en 1972. Esta técnica mejoró en forma notable la sensibilidad de las técnicas previas, ya que se logró combinar la lectura de los resultados con la detección instrumental mediante un espectrofotómetro. Además, el uso de algunos anticuerpos monoclonales contra antígenos parasitarios proporcionó la especificidad necesaria. Esta técnica y algunas de sus variantes lograron aceptación por la versatilidad para adaptarse en la identificación de antígenos y anticuerpos.

Triquinosis

Como ya se explicó ampliamente en otro capítulo, esta infección es causada por el nematodo tisular Trichinella spiralis. En 2002, Tinoco Velázquez y colaboradores emplearon antígenos excretados y secretados de T. spiralis, obtenidos de larvas del tejido muscular de ratas infectadas en laboratorio. Para ello se utilizó la técnica de inmunoelectrotransferencia o Western blot para identificar los antígenos reconocidos por los anticuerpos circulantes en el suero de pacientes con fiebre de causa desconocida. Los antígenos larvarios de T. spiralis han sido clasificados en ocho grupos (TSL-1-TSL-8), de los cuales la familia de glucoproteínas TSL-1 ha sido extensamente estudiada y se le ha asignado una función en la activación de la inmunidad innata al parásito, la activación de células cebadas y la liberación de histamina. Los estudios sugieren que este antígeno está involucrado en la respuesta protectora intestinal a la larva del parásito, pues debido a que es altamente inmunogénico, es un fuerte candidato a vacuna. Esta capacidad inmunogénica de TSL-1 es también útil en el diagnóstico de la infección en animales y humanos al emplearse en una prueba ELISA, mostrando alta sensibilidad y especificidad.

Neurocisticercosis

Peralta y colaboradores encontraron recientemente que una glucoproteína de 14 kDa obtenida de Taenia crassiceps puede sustituir a los antígenos de Taenia solium en las pruebas ELISA y Western blot. Estos investigadores hallaron 100% de concordancia en los resultados con ambas técnicas cuando emplearon esta proteína de 14 kDa. En ese mismo trabajo, los autores incluyeron el líquido cefalorraquídeo y el suero de 64 pacientes con diagnóstico clínico y radiológico de neurocisticercosis. Por su parte, otros autores utilizaron antígenos del líquido de las vesículas de cisticercos de T. crassiceps para el serodiagnóstico de cisticercosis humana con resultados prometedores. Asimismo, la detección de antígenos de T. solium puede ser útil para obtener información de la infección activa y la viabilidad del parásito, lo cual no puede ser determinado con las pruebas de detección de anticuerpos.

Infección por Toxoplasma gondii

El diagnóstico de infección aguda o reciente por T. gondii reviste importancia médica, sobre todo si se trata de mujeres embarazadas. Aunque se han utilizado antígenos crudos y semipurificados, el problema del diagnóstico serológico todavía no está resuelto del todo. En 2000 Suzuki y colaboradores utilizaron un antígeno recombinante de 35 kDa en una técnica ELISA para cuantificar anticuerpos IgM anti-P35. Estos autores estudiaron cuatro casos de mujeres embarazadas con infección reciente por T. gondii donde fue posible demostrar seroconversión de IgM en IgG; en cambio, con la técnica ordinaria el título de anticuerpos del isotipo o clase IgM permaneció alto.

El uso de antígenos químicamente puros y bien caracterizados, como en este caso, no evita los problemas de reacciones cruzadas con infecciones por microorganismos relacionados desde el punto de vista de los antígenos. Para aumentar la sensibilidad de una prueba ELISA para el diagnóstico serológico de infección por T. gondii, Li y colaboradores utilizaron una mezcla de cuatro antígenos recombinantes (rP22, rP25, rP29 y rP35), y con ella lograron establecer diferencia entre mujeres embarazadas con infección aguda por T. gondii y aquellas que tuvieron una infección previa. Recientemente, Attallah y colaboradores detectaron antígenos de T. gondii usando anticuerpos específicos y un Western blot para detectar el antígeno de 36kDa en suero; asimismo, desarrollaron una técnica ELISA para la detección diagnóstica con una sensibilidad de 88% en la infección aguda, 66% en la crónica y especificidad de 91%. La identificación de este antígeno representa una alternativa prometedora para el diagnóstico de la infección activa.

Amibiasis humana

En el estudio de los antígenos de E. histolytica, como en el caso de muchos otros parásitos, se utilizó inmunofluorescencia, contrainmunoelectroforesis y hasta hemaglutinación. Como ya se mencionó en este capítulo, dichas técnicas son de sensibilidad y especificidad bajas; además, la presencia de anticuerpos IgG anti E. histolytica en personas que viven en áreas endémicas tiene poca importancia clínica. Hay muchos artículos científicos publicados que proponen diferentes técnicas y antígenos para confirmar el diagnóstico de absceso hepático amibiano, pero su utilidad es discutible.

En el año 2000, un grupo de investigadores de Bogotá, Colombia, propuso una técnica ELISA con 1.25 µg/ml de antígeno crudo de E. histolytica para diagnóstico de absceso hepático amibiano. Los resultados de este trabajo presentan sensibilidad de 95% y especificidad de 100%; sin embargo, la disponibilidad y la reproducibilidad de una técnica sensible como ELISA, pero con mezcla de antígenos crudos o no purificados, no se recomienda para el laboratorio clínico de rutina.

También en el año 2000, Lee y colaboradores encontraron que con una técnica ELISA pero con un antígeno amebiano obtenido por tecnología del DNA recombinante, llamado proteína de 29 kDa, o incluso con un fragmento de esta proteína, lograron especificidad de 100% en el diagnóstico de absceso hepático amebiano. En cambio, en ese mismo trabajo demostraron que con el uso de la proteína completa de 29 kDa la especificidad bajó a 86.6%. La detección de antígenos de E. histolytica en pacientes con enfermedad intestinal se lleva a cabo con ensayos inmunoenzimáticos en heces fecales, con alta sensibilidad y especificidad y con la capacidad de diferenciar entre E. histolytica y E. dispar.

Otros usos de las técnicas inmunológicas

Algunas de las técnicas y estrategias mencionadas en los párrafos anteriores no sólo se aplican al diagnóstico de enfermedad parasitaria, sino que también se emplean en el aislamiento de antígenos puros de parásitos, como en el caso del uso de anticuerpos monoclonales.

Otros autores han utilizado algunas de las técnicas mencionadas para comprender el mecanismo por el cual algunos antígenos parasitarios son capaces de inducir la formación de anticuerpos IgE. Respecto a las técnicas descritas en este capítulo, se ha descubierto que algunas han sido empleadas para estudiar la diferenciación de monocitos y la maduración de las células dendríticas.